仪器和技术:使用光学显微镜
- 许多生物结构太小,肉眼看不见
- 光学显微镜对科学家来说是一种宝贵的工具,因为它们可以观察和研究组织、细胞和细胞器
- 例如,有丝分裂过程中染色体的运动可以用显微镜观察到
光学显微镜是如何工作的
- 光线被引导穿过玻璃载玻片上支撑的薄薄的生物材料层
- 这种光通过几个透镜聚焦,因此通过目镜可以看到图像
- 将高倍物镜旋转到位,可提高显微镜的放大倍率
装置
- 光学显微镜的主要部件有:
- 目镜镜头
- 物镜
- 在舞台上
- 光源
- 粗、细焦点
- 使用的其他工具:
- 钳
- 剪刀
- 手术刀
- 盖玻片
- 幻灯片
- 吸管
显示光学显微镜所有部件的图像
方法
- 准备幻灯片使用液体样品:
- 用移液管向载玻片中加入几滴样品
- 用盖子盖住液体/涂抹,轻轻按下去除气泡
- 戴手套确保没有外来细胞的交叉污染
- 准备幻灯片使用固体样品:
- 用剪刀剪一小块组织样本
- 剥开或切非常薄的一层将组织样本中的细胞置于载玻片上(使用手术刀或镊子)
- 一些组织样本需要用化学物质处理以杀死/使组织变硬
- 轻轻地把盖子放在上面,按下消除任何气泡
- 一个染色根据所检查的组织类型,可能需要使结构可见
- 使用尖锐物品时要小心,并戴上手套,防止污渍侵蚀皮肤
- 当使用光学显微镜时从低倍率物镜开始:
- 它是更容易找到你在视野中寻找什么
- 这有助于防止伤害为了防止舞台被抬得太高,必须将镜头或盖上
- 防止组织脱水:
- 放置在载玻片上的薄层材料可以迅速干涸
- 向标本中加入一滴水(在盖套下面)可以防止细胞因脱水而受损
- 模糊的:不清楚或模糊的图像:
- 切换到低倍率物镜,并尝试使用粗集中为了得到更清晰的图像
- 考虑试样是否为试样得足够薄为了让光穿过来清楚地看到结构
- 可能有交叉污染外来细胞或异物
- 用光栅测量细胞:
- 一个格一个小圆盘是否有一个刻的统治者
- 它可以被放置在显微镜的目镜中,在视场中起到尺子的作用
- 由于光栅没有固定单元,所以它必须是固定单元校准用于正在使用的物镜。这是用刻在显微镜载玻片上的刻度(一级千分尺)
- 把这两个比例尺放在一起使用,就可以计算出每个计分单位值多少微米
- 在知道这一点之后,该光栅可以作为一个统治者在视野中
阶段千分尺用于找出每个网格单位代表多少微米
限制
- 在不同的标本切片中,细胞或组织结构的大小可能不一致
- 细胞结构是3D的,不同的组织样本也是3D的在不同的平面切割导致在2D幻灯片上观看时不一致
- 光学显微镜没有其他类型的显微镜那样的放大倍率,因此有些结构是看不见的
- 在制备载玻片时对标本的处理可以改变细胞的结构
考试技巧
记住校准当使用格.如果没有校准,那么所采取的测量将是完全任意的!
显微镜下的气体交换
- 用显微镜可以观察到不同生物的气体交换表面
- 它们在显微照片上的表现和在课本上的图表上的表现往往非常不同
- 重要的是能够识别气体交换面和关键结构现在
哺乳动物气体交换
- 下图为染色的肺组织切片
- 的肺泡大小和形状各不相同
- 这是因为它们不再像在活肺中那样膨胀
- 的核显示为黑点
- 血管能在中间发现肺泡吗
- 有时白细胞会出现在组织样本中
图像显示染色的肺组织切片
鱼
- 下图是从角鲨身上取下的染色鱼鳃切片
- 的鳃弓鳃就像脊骨
- 不同的丝显示了许多片晶可见
图为从角鲨身上取下的一段鱼鳃
昆虫
- 由于昆虫非常小,要获得它们气体交换系统的清晰图像可能很困难
- 电子显微镜能拍出清晰的图像吗气门在昆虫表面发现的结构,如下图所示
图像显示在毛毛虫的墙壁上发现了一个喷口
双子叶叶
- 植物通常是显微镜观察的好标本
- 下图所示为双子叶的染色组织切片
- 不同层次的组织和细胞类型清晰可见
- 蜡状表皮
- 表皮层
- 栅栏状叶肉层
- 海绵状叶肉层
- 的气孔是可见的保卫细胞在任何一方
图像显示一段染色的叶子
考试技巧
上面提到的结构的更多显微照片也许值得一看。当你看到更多它们的照片,对它们的结构更加熟悉时,你就能更容易地识别它们!