求葡萄糖的浓度
- 本尼迪克特的解决方案可以用来执行半定量用还原糖溶液测定样品中还原糖的浓度
- 使用过量的本尼迪克特溶液是很重要的,这样就有足够多的硫酸铜(II)来与任何存在的糖反应
- 颜色变化的强度与样品中还原糖的浓度有关
- 呈阳性的测试结果显示颜色光谱从绿色(低浓度)到砖红色(存在高浓度的还原糖)
- 半定量测试可以通过设置具有已知还原糖(如葡萄糖)浓度的标准溶液来进行。
- 这些溶液应使用现有原液的连续稀释来建立
- 然后以同样的方式处理每种溶液:在每个样品中加入相同体积的Benedict溶液,并在水浴中加热(每次最好在相同的温度下)煮沸一段时间(5分钟左右),以允许颜色发生变化
- 重要的是要确保使用过量的本尼迪克特溶液
- 在已知浓度的溶液中观察到的任何颜色变化都可以归因于该溶液中还原糖的浓度
- 对还原糖浓度未知的样品进行相同的程序,然后将其与原液颜色进行比较,以估计存在的还原糖浓度
改变
- 也可以将这个测试标准化,但不是等待一段固定的时间来观察到一系列颜色,而是计算第一个颜色发生变化所需的时间(从蓝色到绿色)。
- 样品中还原糖的浓度越高,观察到颜色变化所需的时间就越短
- 为了避免人类解释颜色的问题,可以使用比色计测量已知浓度的糖溶液的吸光度或光透射率,以建立一个值范围,未知样品可以与校准曲线进行比较
连续稀释
- 连续稀释是通过对原液进行一系列稀释而产生的。浓度降低相同每个试管之间的数量
- 它们可以是“加倍稀释”(即每个试管之间的浓度减半)或所需范围(例如0,2,4,6,8,10 mmol / d)-3)
- 完成一系列稀释以形成一个标准来比较未知浓度
- 比较可以是:
- 视觉
- 通过校准/标准曲线测量
- 用色度计测量的
- 它们可以在以下情况使用:
- 计算细菌或酵母的数量
- 测定未知葡萄糖、淀粉、蛋白质浓度
- 比较可以是:
连续稀释
色度计
- 色度计是一种通过样品发射特定波长(颜色)的光并测量这种光的多少的仪器吸收(任意单元)
- 他们提供了定量测量
- 它们含有不同的波长或颜色滤光片(取决于色度计的型号),因此合适的颜色可以通过样品照射而不会被吸收。这种颜色将成为对比色。红色样品应该有绿光透过。
- 还记得在这个波长的光下,样品看起来是红色的反映了但是其他波长的光会被吸收
- 色度计必须是校准测量前
- 这是通过放置a来完成的空白进入色度计并取一个参考值,其读数应为0(即没有光被吸收)。
- 测量时应定期重复此步骤,以确保吸光度仍为0
- 结果可用于绘制校准曲线或标准曲线
- 可以使用已知浓度的吸光度
- 未知浓度可以从这张图中确定
色度计用于获得定量数据,这些数据可以绘制成校准曲线,用于发现未知浓度