细胞分离和超离心
- 生物学家和其他科学研究人员有时可能想要研究一个特定的细胞器
- 这可能是:
- 在电子显微镜下观察特定细胞器的外观
- 对特定的细胞器进行研究(例如,更多地了解其功能)
- 要做到这一点,a纯样品所需要的(只包含被研究的特定细胞器)
- 细胞器彼此分离的过程被称为细胞分离
- 这个过程包括分手一个合适的组织样本,然后离心法混合物在不同的速度
- 细胞分裂可分为三个阶段:
- 均化作用
- 过滤
- 超速离心法
均化作用
- 均化作用生物学术语是用来描述细胞的分裂
- 组织样本(包含要分解的细胞)必须首先放在试管中冷等渗缓冲溶液
- 解决方案必须是:
- 冰冷的,降低酶的活性分解细胞器
- 等渗的(它必须有水势相同当细胞被分解时),以防止水进入细胞器渗透,这将导致它们膨胀,最终损害他们
- 缓冲的(有缓冲溶液添加),以防止细胞器蛋白质成为变性
- 然后将含有组织的溶液均质匀浆器
- 这是一个类似搅拌机的机器研磨细胞(细胞也可以振动,直到它们破裂)
- 这打破质膜并将细胞器释放到一种叫做匀浆
过滤
- 然后是匀浆(含有匀浆细胞)过滤后的穿过纱布
- 这是为了分离任何大细胞碎片或者没有分解的组织碎片
- 细胞器都是小得多而不是被过滤掉的碎片(它们通过纱布)
- 这就留下了一个解决方案(称为滤液),其中包含细胞器混合
超速离心法
- 滤液被放入管子中,管子被放入容器中离心机
- 离心机是一种分离物质的机器旋转
- 滤液首先在a处旋转低速
- 这导致最大、最重的细胞器(如细胞核)沉淀在管的底部,在那里它们形成一种被称为a的厚沉积物球团
- 其余的细胞器悬浮在颗粒上方的溶液中
- 这个解决方案被称为上层清液
- 上清液为排干了然后放进另一个管子里,管子以更高的速度
- 再一次,这导致较重的细胞器(如线粒体)定居在管的底部,形成一个新的颗粒,并留下一个新的上层清液
- 新的上清液被排干,并放入另一个管中,该管在室温下旋转甚至更高的速度
- 这个过程是重复以越来越快的速度,直到所有不同类型的细胞器被分离出来(或直到所需的细胞器被分离出来)。
- 每个新形成的球团含有比前一个球团更轻的细胞器
- 这些细胞器的质量顺序(从最重到最轻)通常是:
- 核
- 叶绿体(如果对植物组织进行细胞分离)
- 线粒体
- 溶酶体
- 内质网
- 核糖体
用于分离细胞器的细胞分离的三个阶段(均质、过滤和超离心)
考试技巧
这里有很多新的生物学术语,你需要知道它们的定义,包括细胞分离、均质化、匀浆、等渗、超离心和上清。确保你掌握了每一个术语的意思,因为你将能够回答需要这些术语知识的问题,并在回答中使用它们!